Spaltung von DNA mit Restriktionsenzymen






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Längenmessung bei DNA-Molekülen

Nehmen Sie das Lineal (die Hand wird dabei zu einer Faust) und bewegen Sie es zu einer der DNA-Banden. Klicken Sie auf die Bande, deren Länge Sie ermitteln möchten. Daraufhin wird eine Linie von der Wanderungsstrecke des Fragments (auf der x-Achse) zur Kalibrierungskurve gezogen. An ihrem Schnittpunkt mit der Kalibrierungskurve wird eine weitere Linie zu der Länge des Fragments (in Basenpaaren) gezogen. Vielfach lässt man beim Versuch eine Marker-DNA zusammen mit den DNA-Proben laufen, um die DNA-Länge zu bestimmen. Die Marker-DNA (hier der Hind III -Verdau) enthält eine Anzahl DNA-Moleküle mit jeweils bekannter molekularer Größe.
Um die Länge des Fragments in der DNA-II-Bande zu ermitteln, wählen Sie die orangefarbene Bande, die das Fragment repräsentiert. Es wird eine Linie gezogen von dem Endpunkt, zu dem das Fragment gewandert ist (auf der x-Achse), zur Kalibrierungskurve. An der Stelle, an der das Fragment die Kurve schneidet, bildet sich eine weitere Linie zum Wert für die Länge des Fragments in Basenpaaren.

Um die Länge eines DNA-Fragments in der DNA-I-Bande zu bestimmen, klicken Sie erneut auf das Lineal und ziehen es direkt auf die DNA-Bande DNA I. Mit der orangefarbenen Bande können Sie die Länge des DNA-Fragments messen.

Wenn Sie DNA-Fragmente vermessen, sollten Sie darauf achten, dass die kürzesten Fragmente am weitesten wandern.


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