Spaltung von DNA mit Restriktionsenzymen






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Spaltung von DNA mit Restriktionsenzymen
von Peter Russell, Reed College
© 1997, Peregrine Publishers, Inc., alle Rechte vorbehalten

Einleitung
Die aus Bakterien gewonnenen Restriktionsenzyme erkennen ganz bestimmte Sequenzen in der DNA und schneiden sie. Die so entstehenden DNA-Stücke bezeichnet man als Restriktionsfragmente. Restriktionsenzyme sind von größter Bedeutung für die Konstruktion neu kombinierter DNA-Moleküle, wie man sie in gentechnischen Experimenten vornimmt. Ein weiteres Anwendungsgebiet für Restriktionsenzyme ist die Kartierung der Restriktionsschnittstellen in der DNA.

Sie sollten aus Unterricht und Lehrbüchern bereits Grundkenntnisse über die Struktur der DNA sowie über Prinzipien und Abläufe bei der Analyse neu kombinierter DNA-Moleküle besitzen. Diese Aktivität soll ihre Kenntnisse vertiefen; sie befasst sich mit der Struktur und Restriktionsspaltung von DNA, der Analyse der gespaltenen DNA durch Agarosegelelektrophorese, und den Grundsätzen für das Aufstellen einer Restriktionskarte anhand der Rohdaten. In einem Multiple-Choice-Quiz mit 15 Fragen können Sie überprüfen, ob Sie den Stoff verstanden haben. In weiteren drei Fragen sollen Sie unter Beweis stellen, dass Sie aus Größenmessungen von DNA-Fragmenten eine Restriktionskarte konstruieren können. Die richtigen Restriktionskarten können Sie sich dann auf dem Bildschirm ansehen.

Alle Abschnitte dieser Lerneinheit mit Ausnahme der über DNA-Struktur enthalten Animationen, in denen die Grundbegriffe auf dynamische Weise deutlich werden. Die meisten davon laufen ohne besonderes Plug-In. In dem Teil über Restriktionskartierung ist eine interaktive Shockwave-Animation enthalten; Sie können damit die Wanderungsstrecke eines DNA-Fragments nach der Gelelektrophorese messen und anhand der Kalibrierungskurve seine Größe bestimmen.


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